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Real-time PCR for quantitation of bovine viral diarrhea virus RNA using SYBR Green I fluorimetry
bovine viral diarrhea virus RNA real-time RT-PCR SYBR Green I
2015/3/13
Quantitative real-time RT-PCR (qRT-PCR) assay was developed for the detection and quantification of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in clinical samples from persistently infected cattle. qRT-PCR wa...
根据GenBank 登录的水貂肠炎病毒（ＭＥＶ）ＶＰ２ 蛋白基因的保守序列设计了１ 对特异性引物，经ＰＣＲ 扩增出１４６ ｂｐ 的目的片段，并克隆到ｐＭＤ １８ － Ｔ 载体上，提取重组质粒经ＰＣＲ 及测序鉴定正确后，以１０ 倍梯度稀释质粒作为阳性标准品，绘制荧光定量标准曲线，以此建立一种基于ＳＹＢＲ Green 荧光染料的定量ＰＣＲ 特异性检测水貂肠炎病毒的方法。结果表明：该方法对ＭＥＶ 有很好...
旨在建立一种检测马Toll样受体（TLRs）mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR（Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）方法。参照GenBank中马TLRs的基因序列保守区设计特异性引物，以马β肌动蛋白（β-actin）mRNA为内参，建立荧光定量RT-PCR方法。结果，扩增曲线在1×102～1×108 copies...
本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列，设计并合成1对引物，通过PCR扩增ORF2基因片段，将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体，转化大肠杆菌DH5α，经测序鉴定后得到阳性重组质粒，作为标准品模板建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线，并对其灵敏性、特异...
利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627 bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250 fg衣原体DNA。Real-Time PCR方法与免疫荧光方法的检测结果表明：检测4种衣原体临床样本，Real-Time PCR敏感性均在96%~98%；特异性均为100%；这两种方法符合率...
为建立检测禽流感病毒（AIV）的SYBR Green I荧光 RT-PCR方法，根据AIV的 M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞，收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测，试图建立快速检测AIV的SYBR Green I荧光RT-PCR方法，并与普通RT-PCR方法和传统的病毒滴定方法进...